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哈药集团生物疫苗有限公司重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗

信息来源:本站  浏览次数:884  发布时间:2015-10-23
 

本试验为分析免疫质量,及时掌握流行病学动态和免疫效果,我公司在河北省石家庄市和邢台市选取两个蛋鸡场,对我公司重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗( H5 N1Re-6+ Re- 7)抗体的血清学进行连续性的监测,以此掌握我公司重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗( H5 N1Re-6+ Re- 7) 抗体消长规律、产生时间、抗体高度及持续时间等效果。

1 材料和方法

1.1 供试材料

哈药集团生物疫苗有限公司重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗( H5 N1Re-6+ Re- 7)灭活疫苗。

抗体监测试剂 禽流感H5N1 Re-7株和Re-6株抗原及阳性血清,由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供,红细胞悬液是哈药集团生物疫苗有限公司质量管理部提供的SPF级公鸡红血球。

1.2 疫苗效力检测

4周龄SPF35只(由哈药集团生物疫苗有限公司SPF鸡场提供),分成两组,一个实验组,每组20只,对照组15只,实验组注射哈药集团生物疫苗有限公司禽流感H5亚型二价灭活疫苗,每只肌肉注射疫苗0.5ml21日后,实验组、对照组分别采血,分离血清,分别用国家禽流感参考实验室提供的针对禽流感病毒Re-6株和Re-7株免疫抗体的2H5亚型抗原测定HI抗体。

1.3试验鸡群

选择4周龄未经禽流感疫苗免疫的商品蛋鸡(海兰白)在河北省石家庄(A)和邢台市(B场)两个蛋鸡场(15000羽左右),免疫哈药集团生物疫苗有限公司禽流感H5亚型二价灭活疫苗。鸡群在同一管理条件下进行饲养。

1.4 免疫剂量及方法 按照种鸡场提供免疫程序,实验组于4周龄首免,颈部皮下注射0.3 mL/羽;8周龄二免,胸部肌肉注射0.5 mL/羽。

1.5 HI抗体效价测定 鸡群于4周龄(首免当天)、6周龄、7周龄、8周龄(二免当天)9周龄、10周龄、12周龄、14周龄、17周龄、20周龄、23周龄、26周龄,每组随机选取150只鸡翅静脉采血,离心制备血清并按照国家标准红细胞血凝抑制试验( HI )进行抗体检测。

1.6检测试剂和检测方法

试验均用国家标准红细胞血凝抑制试验( HI )进行抗体检测,待检血清HI抗体滴度大于或等于6log2时为抗体合格。 

2 结果

2.1疫苗效力检验结果见表1,对照组为阴性,免疫鸡Re-6株、Re- 7HI抗体几何平均滴度(GMT)≥6log2为合格产品。

1 疫苗效力检测结果(log2

 

Re-6

Re-7

哈药生物疫苗  201409

6.4

6.3

对照组

0

0

2.2 石家庄与邢台市两个蛋鸡场免疫疫苗后,均未见明显不良反应,鸡群状态良好,测定鸡群禽流感Re-6株、Re-7HI抗体效价,并分别计算平均值,结果见表2,绘制抗体消长折线图,见图1、图2

2 禽流感H5N1亚型Re-6株及Re-7HI抗体效价监测结果(log2

周龄

Re-6株(log2

 

Re-7株(log2

A厂组

B厂组

 

A厂组

B厂组

4

1.4±1.2

1.4±1.1

1.1±0.88

1.1±0.88

6

5.8±1.2

6±1.5

6.4±0.7

6.1±1.7

7

7.6±1.6

8±1.2

8.2±1.3

8.4±1.6

8

7.4±1.3

7.9±1.1

7.9±1.5

7.8±1.9

9

8.2±1.5

8±1.2

8.5±1.6

8.4±1.6

10

9.1±2.2

9±2.5

9.5±0.9

9±1.7

12

10.3±1.4

9.7±1.1

10.1±1.7

9.4±1.5

14

11.6±0.8

11±1.8

11.4±1.2

10.9±2.1

17

10.9±2.2

11.4±1.2

11.2±2.3

11.3±0.9

20

10.3±2.6

10±1.3

10±1.2

9.5±1.6

23

7.6±1.7

7±1.5

7.7±2.3

6.9±2.2

26

6±2.4

5.7±1.7

 

6.3±1.4

5.9±1.8

由图1、图2可见,四周龄雏鸡禽流感母源抗体为零或极低,首免后2周,A场组、B场组Re-6株、Re-7株抗体效价达到6log23周各组均达到首免后的抗体高峰,Re-6株抗体6.9~8log2Re-7株抗体8~8.4log2。首免高峰后抗体效价出现下降趋势,于8周龄二免后,三个实验组抗体效价迅速上升,其中A场组抗体效价上升速度最快,6周后(14周龄)达到二免抗体高峰且峰值最高,Re-6株抗体达到11.6log2Re-7株抗体达到11.4log2B场组抗体上升速度、峰值次之,于二免后9周达到抗体高峰。达到峰值后各实验组抗体效价平稳下降,二免后18周,A场组与B场组Re-6株、Re-7株抗体效价略高于6log2,二免后合格抗体可持续16~18周。

2.3 抗体显著性检验(检验)A场与B场采样点之间差异显著(P<0.05)A场与B场差异不显著(P>0.05)。

3 讨论

鸡群HI抗体效价几何平均数达到4log2可判定为免疫合格,据有关资料,HI抗体效价达到4log2时有保护力,但有时能分离到病毒,当达到5log2以上时,可完全保护,并且分离不到病毒。综合考虑现地实际与灭活疫苗抗体产生规律,对于商品蛋鸡,现地应用中以6log2作为抗体合格值及免疫临界值为宜。

在现地应用中,个别养殖户及养殖场不重视禽流感疫苗的免疫,在商品蛋鸡开产前仅进行一次或两次重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗( H5 N1Re-6+ Re- 7)免疫,本次试验由于现地条件限制,仅进行了两次禽流感疫苗免疫,由实验数据可看出,商品蛋鸡在开产前进行一次免疫,抗体峰值较低且下降较快;若进行两次免疫,二免合格抗体可持续16~18周左右,这意味着产蛋鸡群在5~6月龄产蛋率上升期及高峰期,HI抗体效价将降至免疫临界值,如果此时进行加强免疫将对产蛋率产生较大影响。因此根据试验结果建议商品蛋鸡在开产前进行三次H5型禽流感疫苗免疫,15~30日龄进行首免,45~60日龄进行二免,开产前进行三免,按照此程序,合格抗体可较好的保护产蛋高峰期。建议有条件的鸡场在产蛋期定期进行禽流感HI抗体监测,根据监测结果及时进行免疫,同时也应做好H9型禽流感疫苗免疫。